金刚（许冠杰 饰）与光头佬（麦嘉 饰）在一次泰国的任务中不欢而散，自此分道扬镳各奔前程……时间一晃三年，国宝兵马俑与秦皇宝剑在赴港展出的路上被白手套一伙施调包计窃走，自称“新最佳拍档”的飞贼姐弟（利智&张国荣 饰）再由白手套手中夺走宝剑，并高调登报嫁祸于最佳拍档。一时间，大陆方面派出的中国蓝波（李元霸 饰）与白手套等人均认为退出江湖的最佳拍档是夺剑人，对金刚金刚和光头佬展开连番追捕。最终两个老搭档终于澄清误会，联合飞贼姐弟接受大陆方面的艰苦训练，以期能够为保护国宝而战…… 本片是《最佳拍档》系列电影的第五集。

金刚（许冠杰 饰）与光头佬（麦嘉 饰）在一次泰国的任务中不欢而散，自此分道扬镳各奔前程……时间一晃三年，国宝兵马俑与秦皇宝剑在赴港展出的路上被白手套一伙施调包计窃走，自称“新最佳拍档”的飞贼姐弟（利智&张国荣 饰）再由白手套手中夺走宝剑，并高调登报嫁祸于最佳拍档。一时间，大陆方面派出的中国蓝波（李元霸 饰）与白手套等人均认为退出江湖的最佳拍档是夺剑人，对金刚和光头佬展开连番追捕。最终两个老搭档终于澄清误会，联合飞贼姐弟接受大陆方面的艰苦训练，以期能够为保护国宝而战…… 　　本片是《最佳拍档》系列电影的第五集。

剧情围绕神偷黑猫盗宝时无间中遗下一只白手套展开，警方怀疑是国际犯罪集团的“白手套”所为，于是惊动国际刑警，派光头神探前来查案；而黑手党因为有人冒充其“白手套

纽西兰老科学家发明一个名为“天狼星”的三棱镜，它可将人的潜能激发，形成难以置信的超能力。但这项发明很快被当地一黑社会组织盯上，他们袭击实验室，杀害老科学家。危急时刻，天狼星被参加实验的青年金刚（许冠杰 饰）和科学家的女儿莎莉（叶倩文 饰）带出纽西兰，来到香港。返港后，金刚寻求侦探光头佬（麦嘉 饰）的帮助，谁知黑帮尾随而至，虏走光头佬的妻子贺警司（张艾嘉 饰）作人质。为救爱妻，光头佬带着儿子，协同金刚赶至纽西兰……

黑猫（许冠杰 饰）身手敏捷，小有名气。一次，他在巴黎时忽然遭到不明身份的女杀手袭击，当他和对手一路打斗来到铁塔时，伏击在此的大钢牙和刚帽突然出击。措手不及的黑猫眼看性命不保，纵身跳下了塞纳河。 当黑猫醒来的时候，一名自称占士邦的应该特工人员告诉他这是女皇对他的考验，现在他已通过考验，可以正式接受女皇的密令。信以为真的黑猫欣然应允，返港为女皇盗窃一枚极为贵重的宝石。当黑猫费尽九牛二虎之力完成任务后，发现事实并非如此。

性感妖娆的妙龄女子万玲（钟丽缇 饰）是个纵横江湖绝少失手的红颜神骗。某社团老大被万玲骗尽钱财，一气之下心脏病突发身亡。临终前，该老大将社团托付给在美国打拼的独子浩式（谭咏麟 饰），并命令他亲手杀死万玲为自己报仇。虽然一万个不情愿，但迫于老妈（Maria 饰）和社团同袍的压力，浩式最终接手社团，并在神枪手醉枪（梁朝伟 饰）督促下修炼枪法。两人尾随万玲，伺机行动，而浩式却在这一过程中渐渐迷上这个女子，因此他迟迟无法下手。 另一方面，万玲曾用梵高的赝品和黑社会老大雷扬（吴镇宇 饰）交易，骗取对方现金200万，遂令雷扬暴跳如雷，不断派人追杀。几组人马凑在一起，场面越来越乱……

赛文三年来一直躺在病床上，当医生向赛文的父母下了病危通知书后，他俩凭着对儿子的了解，做了些自以为能满足儿子遗愿的事情，并把赛文将要去世的消息告诉了赛文的两个发小，俊俊和山猪。两个发小也凭着自己的一厢情愿帮赛文完成遗愿，结果事与愿违，不仅没达到目的还闯了祸。种种的迹象令赛文起了疑心，当他从山猪的口中得知自己将要去世的消息后，赛文说出了在自己心中压抑了许久的愿望：他要成为一个真正的男人。山猪和俊俊一时手足无措，但为了兄弟间的友情，他俩还是答应帮赛文完成愿望。在这过程中，山猪和俊俊不仅要背着赛文的父母，还要遭到各种不理解带来的伤害，他俩要像大人做出决定，这场提早到来的成人礼能否达成所愿？

警察里面也有败类，少数的白人警察由于种族优越感，专找少数民族下手，罗兹奋不顾身地要揭穿他们的假面具，调查局也派出了探员在警察局卧底，为的是要找出事情的真相。警局内部塔沃拉处处与罗兹作对，罗兹对塔沃拉的做事风格也不赞同。罗兹与贝克是合作搭档，一次任务中，罗兹的子弹被贝克换走，但贝克却不幸殉职。警局来了一个新人，德布鲁勒。德布鲁勒成了罗兹的新搭档，一次执行任务中，德布鲁勒受伤，也因此，罗兹知道了德布鲁勒的真正身份。罗兹与德布鲁勒配合揭露警局内的惊天阴谋。

《最佳拍档》节目以妙趣横生的游戏竞技为主，参赛选手以搭档形式参加，通过欢快游戏层层递进，彰显了搭档间的默契和感情。