“超杀女”科洛·莫瑞兹饰演的少女凯拉刚刚入职豪华大酒店，就碰上了叫人头疼的难题——杰瑞竟然想在酒店里定居，令酒店最近承接的世纪婚礼岌岌可危。于是，汤姆被凯拉雇佣成为酒店员工，目的是赶走杰瑞，这对欢喜冤家就此展开了一场你追我赶的爆笑喜剧。

汤姆和杰瑞依旧生活在常见的家庭场景中，作为瑞克和金洁夫妇的宠物，他们之间的追逐和斗智斗勇从未停止。在这个环境里，他们会因为争夺食物、玩具或者地盘等引发一系列滑稽故事，比如汤姆为了抓住杰瑞设下各种陷阱，却总是自己中招；杰瑞则凭借灵活的身手和聪明才智一次次逃脱，还时不时地捉弄汤姆。除了汤姆和杰瑞这对核心主角，大狗斯派克、泰菲等老朋友也会继续登场。他们之间的关系依旧错综复杂，有时会因为共同的目标而合作，比如一起对抗其他外来的动物或者解决一些突发的问题；有时又会因为各自的利益产生矛盾和冲突，引发更多搞笑的情节。另外第五季推出了致敬经典童话的故事，由一只年长的老鼠在篝火旁向其他小老鼠讲述汤姆和杰瑞为主角的故事。在这些故事中，汤姆和杰瑞会被赋予各种童话角色，以独特的方式演绎经典童话，可能会有全新的角色造型和情节设定，为观众带来不一样的童话体验。