本片取材于马三立、马季两位著名相声演员的部分相声段子。其中包括马三立先生的《逗你玩》、《家传秘方》、《开粥厂》，马季的《多层饭店》、《吹牛》、《装小嘴》、《五官争功》等观众耳熟能详的作品。用动画的形式予以创造性演绎。内容轻松活泼，语言幽默诙谐，并融入了新的时代色彩，让相声这一古老的曲艺形式散发出无穷的魅力。

《笑掉江湖》收录了三十四部经典的相声篇章，每一部都在观众心中留下了深刻的印象，如《吃饺子》、《广东话》、《哭的功能》等等。而且本片开创了动漫演绎相声的新形式，幽默诙谐的演绎方式，让观众过目难忘。